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Contribution au développement d'une technique d'identification d'allergènes de froment par Western blot 2D : Comparaison de la composition protéique de différentes variétés de froment / Adeline Heynen

Public ISBD Titre : Contribution au développement d'une technique d'identification d'allergènes de froment par Western blot 2D : Comparaison de la composition protéique de différentes variétés de froment Type de document : TFE Auteurs : Adeline Heynen, Auteur Editeur : Angleur : HELMo Sainte-Julienne Année de publication : 2015 Note générale : Travail de fin d'études (TFE) -- Bachelier-Technologue de laboratoire médical -- HELMo Sainte-Julienne, Angleur, 2015 Langues : Français (fre) Mots-clés : 1. Objectif Le but de ce travail est de comparer la composition protéique de 10 variétés de froment et de mettre en évidence des éventuelles variations d’expressions des allergènes entre ces variétés. 2. Introduction L’ensemble des protéines (protéome) du froment est étudié afin de comparer la composition protéique des variétés de froment. On a recourt, pour ce faire, à une stratégie de séparation des protéines par électrophorèse SDS–PAGE (séparation selon la taille) d’une part et par focalisation isoélectrique IEF (séparation selon la charge électrique) d’autre part. Le Western blot est utilisé pour localiser des protéines d’intérêt. La technique est basée sur la réaction antigènes-anticorps pour détecter les allergènes. 3. Matériels et méthodes - Broyage mécanique des grains de froment - Extraction des protéines par solubilisation du froment dans un tampon d’extraction. - Dosage des protéines par BCA Protein Assay Kit. - Electrophorèse SDS-PAGE (1D) - Electrophorèse 2D (combinaison de l’IEF et du SDS-PAGE). - Western blot 1D ou 2D 4. Résultats L’analyse 1D (électrophorèse et Western blot 1D) des protéines totales du froment montre des profils protéiques semblables mais pas identiques. Les profils protéiques obtenus sont trop complexes pour permettre une analyse détaillée des bandes. L’analyse 2D (électrophorèse et Western blot 2D) montre plus en détail les disparités dans les profils protéiques des différentes variétés de froment. Les différences en 1D et 2D se marquent au niveau de l’intensité des bandes et spots. 5. Conclusion L’ensemble des résultats montre qu’il y a bien des différences dans le profil protéique des variétés de froment étudiées. Contribution au développement d'une technique d'identification d'allergènes de froment par Western blot 2D : Comparaison de la composition protéique de différentes variétés de froment [TFE] / Adeline Heynen, Auteur . - Angleur : HELMo Sainte-Julienne, 2015. Travail de fin d'études (TFE) -- Bachelier-Technologue de laboratoire médical -- HELMo Sainte-Julienne, Angleur, 2015 Langues : Français (fre) Mots-clés : 1. Objectif Le but de ce travail est de comparer la composition protéique de 10 variétés de froment et de mettre en évidence des éventuelles variations d’expressions des allergènes entre ces variétés. 2. Introduction L’ensemble des protéines (protéome) du froment est étudié afin de comparer la composition protéique des variétés de froment. On a recourt, pour ce faire, à une stratégie de séparation des protéines par électrophorèse SDS–PAGE (séparation selon la taille) d’une part et par focalisation isoélectrique IEF (séparation selon la charge électrique) d’autre part. Le Western blot est utilisé pour localiser des protéines d’intérêt. La technique est basée sur la réaction antigènes-anticorps pour détecter les allergènes. 3. Matériels et méthodes - Broyage mécanique des grains de froment - Extraction des protéines par solubilisation du froment dans un tampon d’extraction. - Dosage des protéines par BCA Protein Assay Kit. - Electrophorèse SDS-PAGE (1D) - Electrophorèse 2D (combinaison de l’IEF et du SDS-PAGE). - Western blot 1D ou 2D 4. Résultats L’analyse 1D (électrophorèse et Western blot 1D) des protéines totales du froment montre des profils protéiques semblables mais pas identiques. Les profils protéiques obtenus sont trop complexes pour permettre une analyse détaillée des bandes. L’analyse 2D (électrophorèse et Western blot 2D) montre plus en détail les disparités dans les profils protéiques des différentes variétés de froment. Les différences en 1D et 2D se marquent au niveau de l’intensité des bandes et spots. 5. Conclusion L’ensemble des résultats montre qu’il y a bien des différences dans le profil protéique des variétés de froment étudiées.

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Rangé en	Support	Localisation	Section	Disponibilité	Code-barres
TFE BIOMED 15/HEY	Mémoire / TFE	Bibliothèque HELMo Campus de l'Ourthe	Libre-Accès	Disponible	CO2996

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