| Titre : | Contribution au criblage de programmes d’immunisations en vue de la production d’un nouvel anticorps monoclonal | | Type de document : | TFE | | Auteurs : | Kevin Simonis, Auteur | | Editeur : | Angleur : HELMo Sainte-Julienne | | Année de publication : | 2016 | | Importance : | 62 p. | | Présentation : | ill. en couleur | | Note générale : | TFE (Travail de fin d'études) -- Bachelier-Technologue de laboratoire médical -- HELMo Sainte-Julienne, Angleur, 2016 | | Langues : | Français (fre) | | Mots-clés : | UROC arthrose biomarqueur ELISA antigène anticorps polyclonal anticorps monoclonal immunisation criblage | | Index. décimale : | 60 Biotechnologie | | Résumé : | Le laboratoire UROC travaille sur la mise au point de nouveau biomarqueur de l’arthrose. Dans cet objectif, il souhaite produire de nouveaux anticorps monoclonaux qui vont reconnaitre spécifiquement des cibles identifiées par protéomique pouvant différencier les patients sains des patients arthrosiques. Le but étant de trouver des méthodes de diagnostic, idéalement précoce, de l’arthrose pour pouvoir traiter le plus rapidement possible cette maladie.
Pour obtenir ces anticorps monoclonaux, différents programmes d’immunisation ont déjà été mis sur pieds en 2015, mais malheureusement ces derniers n’ont pas abouti. Début 2016, 5 nouveaux programmes d’immunisation ont été relancés.
Lors des précédents programmes d’immunisation, les peptides étaient couplés à la KLH. Dans les programmes ART007, ART008, ART009 et ART010, concernés par ce travail, les peptides utilisés pour l’immunisation sont couplés à la BSA. Dans les anciens systèmes de dosage, la BSA était utilisée comme agent bloquant. Etant donné que dans ces nouveaux programmes les peptides immunogènes sont couplés à la BSA, il est nécessaire de trouver un autre agent bloquant pour l’ELISA afin de ne pas détecter les anticorps anti-BSA. Différents agents bloquants à différentes concentrations seront comparés afin de déterminer lequel est le meilleur pour notre ELISA. Les tampons de dilution seront également comparés. Des plaques ELISA de différentes qualités et fabricants seront comparés afin de déterminer laquelle est la plus adéquate.
Une fois que ces différentes conditions expérimentales testées et validées, les sérums correspondant aux quatre programmes (ART007-010) seront testés sur la présence d’anticorps anti-biomarqueur. Les surnageants des puits de fusion 96 puits seront également testés pour voir si les hybridomes produisent bien les anticorps recherchés. Une fois cette étape validée, la réponse sera transmise au sous-traitant en charge des programmes et les hybridomes seront placés en culture sur des plaques 24 puits. | | Nom de la société/Institution/Lieu de stage : | UROC | | Année académique : | 2015-2016 | | Maître de Stage : | Sanchez, Christelle | | Promoteur : | Quinting, Birgit | | Etudes : | Technologue de laboratoire médical |
Contribution au criblage de programmes d’immunisations en vue de la production d’un nouvel anticorps monoclonal [TFE] / Kevin Simonis, Auteur . - Angleur : HELMo Sainte-Julienne, 2016 . - 62 p. : ill. en couleur. TFE (Travail de fin d'études) -- Bachelier-Technologue de laboratoire médical -- HELMo Sainte-Julienne, Angleur, 2016 Langues : Français ( fre) | Mots-clés : | UROC arthrose biomarqueur ELISA antigène anticorps polyclonal anticorps monoclonal immunisation criblage | | Index. décimale : | 60 Biotechnologie | | Résumé : | Le laboratoire UROC travaille sur la mise au point de nouveau biomarqueur de l’arthrose. Dans cet objectif, il souhaite produire de nouveaux anticorps monoclonaux qui vont reconnaitre spécifiquement des cibles identifiées par protéomique pouvant différencier les patients sains des patients arthrosiques. Le but étant de trouver des méthodes de diagnostic, idéalement précoce, de l’arthrose pour pouvoir traiter le plus rapidement possible cette maladie.
Pour obtenir ces anticorps monoclonaux, différents programmes d’immunisation ont déjà été mis sur pieds en 2015, mais malheureusement ces derniers n’ont pas abouti. Début 2016, 5 nouveaux programmes d’immunisation ont été relancés.
Lors des précédents programmes d’immunisation, les peptides étaient couplés à la KLH. Dans les programmes ART007, ART008, ART009 et ART010, concernés par ce travail, les peptides utilisés pour l’immunisation sont couplés à la BSA. Dans les anciens systèmes de dosage, la BSA était utilisée comme agent bloquant. Etant donné que dans ces nouveaux programmes les peptides immunogènes sont couplés à la BSA, il est nécessaire de trouver un autre agent bloquant pour l’ELISA afin de ne pas détecter les anticorps anti-BSA. Différents agents bloquants à différentes concentrations seront comparés afin de déterminer lequel est le meilleur pour notre ELISA. Les tampons de dilution seront également comparés. Des plaques ELISA de différentes qualités et fabricants seront comparés afin de déterminer laquelle est la plus adéquate.
Une fois que ces différentes conditions expérimentales testées et validées, les sérums correspondant aux quatre programmes (ART007-010) seront testés sur la présence d’anticorps anti-biomarqueur. Les surnageants des puits de fusion 96 puits seront également testés pour voir si les hybridomes produisent bien les anticorps recherchés. Une fois cette étape validée, la réponse sera transmise au sous-traitant en charge des programmes et les hybridomes seront placés en culture sur des plaques 24 puits. | | Nom de la société/Institution/Lieu de stage : | UROC | | Année académique : | 2015-2016 | | Maître de Stage : | Sanchez, Christelle | | Promoteur : | Quinting, Birgit | | Etudes : | Technologue de laboratoire médical |
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