Titre : | La voie de signalisation du récepteur aux antigènes des lymphocytes T : mise au point de l’activation ex vivo des lymphocytes T CD4 naïfs et analyse de la fonction de la 5-phosphatase INPP5K | Type de document : | TFE | Auteurs : | Sophie Dantinne, Auteur | Editeur : | Angleur : HELMo Sainte-Julienne | Année de publication : | 2022 | Importance : | 53 p. | Présentation : | ill. couleur | Note générale : | TFE (Travail de Fin d'Etudes) -- Bachelier-Technologue de laboratoire médical -- HELMo Sainte-Julienne, Angleur, 2022 | Langues : | Français (fre) | Résumé : | Afin d’aboutir à la rédaction de ce travail, un stage a été réalisé dans le laboratoire de Génétique Fonctionnelle du GIGA. La thématique de recherche de ce laboratoire est centralisée sur l’analyse des fonctions d’une enzyme apparentée à la famille des phosphoinositide 5-phosphatases : INPP5K. Plus précisément, les chercheurs de ce laboratoire étudient les fonctions de cette phosphatase dans le système immunitaire.
Le sujet étudié lors de mon stage est la résultante de résultats préliminaires obtenus par ces chercheurs. En effet, lors d’une analyse préliminaire du système hématopoïétique de souris n’exprimant plus INPP5K dans toutes les cellules issues de ce système, l’équipe du Pr. Schurmans a observé un très grand nombre d’anomalies. Parmi celles-ci, une diminution significative, dans la rate et le sang, du nombre de lymphocytes T CD4. Compte tenu de l’absence de différence du nombre de progéniteur des lymphocytes T dans le thymus de ces souris génétiquement modifiées, leur attention a été portée sur l’étude du rôle d’INPP5K dans les lymphocytes T CD4 naïfs. Pour déterminer avec plus de précision la/les fonction(s) d’INPP5K dans ces cellules et, puisque la voie de signalisation du TCR est une des voies prédominantes impliquée dans la survie des lymphocytes T CD4 naïfs, ils ont décidé d’analyser la fonction d’INPP5K lors de l’activation de la voie du TCR dans les lymphocytes T CD4 naïfs.
Cette analyse expérimentale est le sujet de mon stage TFE.
La volonté d’étudier la fonction d’INPP5K dans la voie d’activation du TCR dans les lymphocytes T CD4 naïfs provient de deux constatations. Tout d’abord, la fonction de cette enzyme dans les lymphocytes T n’est pas connue, la plupart des études réalisées proviennent du laboratoire où ce stage a été effectué et actuellement, rien n’est encore publié. De plus, au vu des études précédemment réalisées, chez les souris n’exprimant pas INPP5K, le nombre de lymphocytes T CD4 diminue fortement dans le sang et dans la rate. En revanche, aucune différence du nombre de progéniteurs des lymphocytes T n’a été observée dans le thymus.
L’hypothèse alors émise est qu’INPP5K joue un rôle dans l’activation de ces cellules, et plus précisément sur la voie de signalisation du TCR. En effet, cette voie est impliquée dans la survie des lymphocytes T CD4 naïfs et les deux substrats d’INPP5K (le PI(4,5)P2 et le PI(3,4,5)P3) interviennent dans cette voie de signalisation.
Pour réaliser ce travail, des souris contrôles (WT) et des souris chez lesquelles INPP5K est inactivé uniquement dans la lignée des lymphocytes T (CD4-Cre ou KO) ont été analysées.
Le suivi de l’activation des lymphocytes a été réalisé grâce à la cytométrie en flux.
Cette étude a été réalisée en deux étapes :
1) La mise au point d’un protocole permettant l’activation ex vivo de la voie du TCR des lymphocytes T CD4 naïfs chez la souris WT ;
2) L’analyse de l’activation ex vivo de la voie du TCR dans les lymphocytes T CD4 naïfs de souris WT et CD4-Cre ou KO. | Nom de la société/Institution/Lieu de stage : | GIGA-Cancer - ULiège | Année académique : | 2021-2022 | Maître de Stage : | Schurmans, Stéphane | Promoteur : | Lejeune, Murielle | Etudes : | Technologue de laboratoire médical |
La voie de signalisation du récepteur aux antigènes des lymphocytes T : mise au point de l’activation ex vivo des lymphocytes T CD4 naïfs et analyse de la fonction de la 5-phosphatase INPP5K [TFE] / Sophie Dantinne, Auteur . - Angleur : HELMo Sainte-Julienne, 2022 . - 53 p. : ill. couleur. TFE (Travail de Fin d'Etudes) -- Bachelier-Technologue de laboratoire médical -- HELMo Sainte-Julienne, Angleur, 2022 Langues : Français ( fre) Résumé : | Afin d’aboutir à la rédaction de ce travail, un stage a été réalisé dans le laboratoire de Génétique Fonctionnelle du GIGA. La thématique de recherche de ce laboratoire est centralisée sur l’analyse des fonctions d’une enzyme apparentée à la famille des phosphoinositide 5-phosphatases : INPP5K. Plus précisément, les chercheurs de ce laboratoire étudient les fonctions de cette phosphatase dans le système immunitaire.
Le sujet étudié lors de mon stage est la résultante de résultats préliminaires obtenus par ces chercheurs. En effet, lors d’une analyse préliminaire du système hématopoïétique de souris n’exprimant plus INPP5K dans toutes les cellules issues de ce système, l’équipe du Pr. Schurmans a observé un très grand nombre d’anomalies. Parmi celles-ci, une diminution significative, dans la rate et le sang, du nombre de lymphocytes T CD4. Compte tenu de l’absence de différence du nombre de progéniteur des lymphocytes T dans le thymus de ces souris génétiquement modifiées, leur attention a été portée sur l’étude du rôle d’INPP5K dans les lymphocytes T CD4 naïfs. Pour déterminer avec plus de précision la/les fonction(s) d’INPP5K dans ces cellules et, puisque la voie de signalisation du TCR est une des voies prédominantes impliquée dans la survie des lymphocytes T CD4 naïfs, ils ont décidé d’analyser la fonction d’INPP5K lors de l’activation de la voie du TCR dans les lymphocytes T CD4 naïfs.
Cette analyse expérimentale est le sujet de mon stage TFE.
La volonté d’étudier la fonction d’INPP5K dans la voie d’activation du TCR dans les lymphocytes T CD4 naïfs provient de deux constatations. Tout d’abord, la fonction de cette enzyme dans les lymphocytes T n’est pas connue, la plupart des études réalisées proviennent du laboratoire où ce stage a été effectué et actuellement, rien n’est encore publié. De plus, au vu des études précédemment réalisées, chez les souris n’exprimant pas INPP5K, le nombre de lymphocytes T CD4 diminue fortement dans le sang et dans la rate. En revanche, aucune différence du nombre de progéniteurs des lymphocytes T n’a été observée dans le thymus.
L’hypothèse alors émise est qu’INPP5K joue un rôle dans l’activation de ces cellules, et plus précisément sur la voie de signalisation du TCR. En effet, cette voie est impliquée dans la survie des lymphocytes T CD4 naïfs et les deux substrats d’INPP5K (le PI(4,5)P2 et le PI(3,4,5)P3) interviennent dans cette voie de signalisation.
Pour réaliser ce travail, des souris contrôles (WT) et des souris chez lesquelles INPP5K est inactivé uniquement dans la lignée des lymphocytes T (CD4-Cre ou KO) ont été analysées.
Le suivi de l’activation des lymphocytes a été réalisé grâce à la cytométrie en flux.
Cette étude a été réalisée en deux étapes :
1) La mise au point d’un protocole permettant l’activation ex vivo de la voie du TCR des lymphocytes T CD4 naïfs chez la souris WT ;
2) L’analyse de l’activation ex vivo de la voie du TCR dans les lymphocytes T CD4 naïfs de souris WT et CD4-Cre ou KO. | Nom de la société/Institution/Lieu de stage : | GIGA-Cancer - ULiège | Année académique : | 2021-2022 | Maître de Stage : | Schurmans, Stéphane | Promoteur : | Lejeune, Murielle | Etudes : | Technologue de laboratoire médical |
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