Titre : | Régulation du dialogue entre adipocytes et cellules cancéreuses | Type de document : | TFE | Auteurs : | Morgane Masereel, Auteur | Editeur : | Angleur : HELMo Sainte-Julienne | Année de publication : | 2022 | Importance : | 63 p. | Présentation : | ill. couleur | Note générale : | TFE (Travail de Fin d'Etudes) -- Bachelier-Technologue de laboratoire médical -- HELMo Sainte-Julienne, Angleur, 2022 | Langues : | Français (fre) | Résumé : | Ce travail de fin d’études vise à déterminer de quelle manière les cellules tumorales interagissent avec leur microenvironnement. Il étudie plus particulièrement leurs interactions
avec les adipocytes et leur impact sur la lipolyse, celles-ci ayant été moins caractérisées.
Dans un premier temps, nous nous sommes intéressés à l’expression des gènes régulateurs de la lipolyse au sein de cultures de cellules 3T3-L1 dans du milieu conditionné par des
cellules tumorales E0771. Nous avons plus particulièrement ciblé le gène FSP27, responsable de l’expression de la protéine FSP27, une protéine inhibitrice de la lipolyse. D’autres
gènes tels que ATGL, CGI-58, G0S2 ou HSL ont également été étudiés. Nous avons étudié de quelle manière le pH acide du microenvironnement tumoral influençait l’expression de ces différents gènes. Pour cela, nous avons cultivé des cellules 3T3-L1 dans du milieu conditionné par des cellules tumorales E0771 dans le but de mimer les conditions du microenvironnement tumoral. Nous avons également étudié l’altération de l’expression de ces différents gènes d’une part en rectifiant le pH à une valeur physiologique par l’ajout d’hydroxyde de sodium, et d’autre part par l’ajout de glucose, substrat principal de la glycolyse.
La variation de l’expression de FSP27 dans ces conditions fut étudiée par Western Blot ainsi que par PCR. L’expression d’ATGL, CGI-58, G0S2 et HSL, fut, quant à elle, déterminée par PCR.
Dans un deuxième temps, nous avons réalisé, par spectrophotométrie, le dosage du glycérol libéré en une heure dans le milieu extracellulaire par les préadipocytes 3T3-L1 différenciés.
Un dosage protéique fut également réalisé afin d’exprimer le rapport de la quantité de glycérol sécrété par milligramme de protéine. Le glycérol étant un produit de la lipolyse, son dosage permit d’estimer le taux de lipolyse dans les différentes cultures réalisées et dans les différentes conditions de pH. | Nom de la société/Institution/Lieu de stage : | Laboratoire de Biologie des Tissus Conjonctifs | Année académique : | 2021-2022 | Maître de Stage : | Deroanne, Christophe | Promoteur : | Craps, Julie | Etudes : | Technologue de laboratoire médical |
Régulation du dialogue entre adipocytes et cellules cancéreuses [TFE] / Morgane Masereel, Auteur . - Angleur : HELMo Sainte-Julienne, 2022 . - 63 p. : ill. couleur. TFE (Travail de Fin d'Etudes) -- Bachelier-Technologue de laboratoire médical -- HELMo Sainte-Julienne, Angleur, 2022 Langues : Français ( fre) Résumé : | Ce travail de fin d’études vise à déterminer de quelle manière les cellules tumorales interagissent avec leur microenvironnement. Il étudie plus particulièrement leurs interactions
avec les adipocytes et leur impact sur la lipolyse, celles-ci ayant été moins caractérisées.
Dans un premier temps, nous nous sommes intéressés à l’expression des gènes régulateurs de la lipolyse au sein de cultures de cellules 3T3-L1 dans du milieu conditionné par des
cellules tumorales E0771. Nous avons plus particulièrement ciblé le gène FSP27, responsable de l’expression de la protéine FSP27, une protéine inhibitrice de la lipolyse. D’autres
gènes tels que ATGL, CGI-58, G0S2 ou HSL ont également été étudiés. Nous avons étudié de quelle manière le pH acide du microenvironnement tumoral influençait l’expression de ces différents gènes. Pour cela, nous avons cultivé des cellules 3T3-L1 dans du milieu conditionné par des cellules tumorales E0771 dans le but de mimer les conditions du microenvironnement tumoral. Nous avons également étudié l’altération de l’expression de ces différents gènes d’une part en rectifiant le pH à une valeur physiologique par l’ajout d’hydroxyde de sodium, et d’autre part par l’ajout de glucose, substrat principal de la glycolyse.
La variation de l’expression de FSP27 dans ces conditions fut étudiée par Western Blot ainsi que par PCR. L’expression d’ATGL, CGI-58, G0S2 et HSL, fut, quant à elle, déterminée par PCR.
Dans un deuxième temps, nous avons réalisé, par spectrophotométrie, le dosage du glycérol libéré en une heure dans le milieu extracellulaire par les préadipocytes 3T3-L1 différenciés.
Un dosage protéique fut également réalisé afin d’exprimer le rapport de la quantité de glycérol sécrété par milligramme de protéine. Le glycérol étant un produit de la lipolyse, son dosage permit d’estimer le taux de lipolyse dans les différentes cultures réalisées et dans les différentes conditions de pH. | Nom de la société/Institution/Lieu de stage : | Laboratoire de Biologie des Tissus Conjonctifs | Année académique : | 2021-2022 | Maître de Stage : | Deroanne, Christophe | Promoteur : | Craps, Julie | Etudes : | Technologue de laboratoire médical |
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